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禽腺病毒PCR試劑盒注意事項方法
點擊次數:57 發布時間:2021-03-02

禽腺病毒PCR試劑盒樣品的采集:

按照相關標準采集。標本短期內可保存于-20℃,長期保存可置-70℃。但不能超過6個月,標本運送應采用0℃。

血清:用一次性無菌注射器抽取靜脈血2mL,注入無菌的干燥玻璃管,室溫(22-25℃)放置30-60min,血標本可自發完成凝集析出血清,或直接使用水平離心機,3000rpm離心5min,吸取上層血清,轉移至1.5mL滅菌離心管。

血漿:用一次性無菌注射器抽取靜脈血2mL,注入含EDTA2Na(乙二胺四乙酸二鈉)或檸檬酸鈉抗凝劑的玻璃管,立即輕輕顛倒玻璃管混合5-10次,使抗凝劑與靜脈血充分混勻,5-10min后即可分離出血漿,轉移至1.5mL滅菌離心管。

拭子、分泌物等樣品:在裝有拭子或分泌物的離心管中加入500µL PBS或生理鹽水,劇烈振蕩30s。棉拭子盡量擠出液體轉移到無RNA酶污染的離心管中,6000rpm離心20s,取上清備用。

病灶組織樣品:稱取組織約0.1g于研磨器或組織勻漿器中研磨(置于冰上或加入液氮),再加1mL生理鹽水研磨至無塊狀物,然后將樣品轉至1.5mL滅菌離心管中,8000rpm離心2min,取上清液于1.5mL滅菌離心管中。

樣品RNA提取
可采購北京百奧萊博科技有限公司生產的RNA提取試劑盒(過柱法-熒光配套)或其他合適的商業化產品,并按照相應試劑盒說明進行操作。

禽腺病毒PCR試劑盒注意事項:

(1) 初次使用前請仔細閱讀說明書。并嚴格按照說明書步驟操作。

(2) 所有使用的離心管高壓滅菌,而且必須不含RNA酶。

(3) PCR操作應嚴格按照要求分區(試劑配制區、標本處理區、PCR擴增區等),防止實驗室污染。

(4) 樣本提取、試劑配置、加樣需在不同區的超凈工作臺進行,以免污染。

(5) 試劑盒里所有物品應視為污染物對待,并按照衛生部《微生物生物醫學實驗室生物安全通則》進行處理。

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